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El sistema molecular HybriScan

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July 21, 2022
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El sistema molecular HybriScan

Cuando necesites de un método confiable para control microbiológico de la contaminación en la producción de alimentos, desde la materia prima hasta producto terminado, sabes que los métodos de plaqueo convencional tardan demasiado.

HybriScan® es la solución para análisis rápidos de bebidas, aguas y alimentos. Los kits HybriScan® proveen detección molecular rápida de  microorganismos deteriorantes y patógenos a bajo costo.

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El Sistema HybriScan® está basado en la detección de rRNA especifico del microorganismo que queremos detectar usando la Hibridación tipo sándwich. La señal de lectura es generada  visualmente por el cambio de color de una reacción enzimática y los resultados son obtenidos después de solo 2 horas del inicio de la prueba después del tiempo de pre-enriquecimiento.

Usando dos tipos diferentes de sondas específicas para detección del RNA ribosomal del microorganismo que buscamos minimiza la  posibilidad de falsos positivos.


– Detecta solamente células vivas.
– No es sensible a interferencias de matriz del alimento.
– Alta especificidad.
– Resultados con excelente costo-beneficio por usar lector de placas tradicionales (o lectura visual para resultados cualitativos).
– Permite lecturas cuantitativas y cualitativas de acuerdo al grupo del organismo buscado.
– Permite análisis en gran cantidad de muestras.
– Puede ser usado para detectar microorganismos no cultivables.
– Resultados en solo 2 horas.

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Principio de la tecnología

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El método HybriScan® está basado en la detección de rRNA vía eventos de hibridación y captura especifica de sondas.

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La hibridación tipo Sándwich tiene alta sensibilidad, detectando attomoles de las moléculas del rRNA Target en muestras biológicas sin tratamiento porque no  está susceptible a interferencias de matriz.

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Una sonda de captura es usada para inmovilizar la secuencia del RNA “target” en las laterales     de los pocillos de una placa o bandeja tipo ELISA. Una sonda marcada con digoxigenina permite una conexión enzimática que permite una señal para lectura óptica.

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La detección del RNA “target” resulta de la aplicación de Fragmentos de Enzima anti-DIG-horseradish peroxidase Fab. El complexo formado con Tetrametilbenzadina (TMB) de color azul es observado a simple vista y el resultado también puede ser leído en una lectora cambiando el color azul a amarillo utilizando el reactivo del kit para lectura en 450 nm.




1. Especificidad para detectar secuencias del rRNA usando sondas de captura y detección.
2. Sondas marcadas con Biotina son inmovilizadas en las paredes impregnadas por Estreptavidina.



– La Digoxigenina interacciona con el fragmento de la enzima DIG-peroxidasa Fab.
– El complejo deseado es visualizado usando el sustracto TMB ( tetrametilbenzadina) mostrando color azul visible a simple vista y también se permite adicionar solución acida para cambiar a color amarillo y leer en lectora de ELISA a 450nm

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Workflow – El flujo de trabajo

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El método solo necesita una centrifuga, un agitador térmico y un lector de microplaca. El análisis completa llevará 2 horas usando los kits HybriScan®D (cuantitativos) y cerca de 1 hora para los kits HybriScan®I (Identificación).

Los resultados cualitativos pueden ser obtenidos por simple vista del cambio de color, para los resultados cuantitativos se deberá usar el lector de placas.



Hay dos tipos de kits disponibles:

– Los kits de Detección (D-kits) contiene 96 reacciones (12 strips con 8 celdas(pocillos)) para pruebas cuantitativas
– Los kits de Identificación (I-kits) contiene 48 reacciones (6 strips con 8 celdas (pocillos)) para pruebas identificación

   

                               

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